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　　正在比来的一项探索中，米兰比可卡大学、维罗纳大学和病院相信基金会以及Brescia的Spedali Civili病院的探索职员，拓荒了一种基于刚果红荧光判辨全切片图像（WSI）检测肾脏淀粉样变性的新举措。

　　与目前的金轨范刚果红双折射比拟，WSI上刚果红荧光判辨正在检测肾淀粉样变性方面供应了极好的查察者间相仿性和高智慧度以及特异性。这些发明标明，刚果红荧光能够降服刚果红双折射的限度性，鼓励肾脏淀粉样变性的数字化和盘算判辨。

　　“这项探索标明，刚果红荧光是检测肾淀粉样变性的刚果红双折射的牢靠替换品，并供应了一种主动化盘算举措来普及所提出举措的诊断功能。”首席探索员Vincenzo L Imperio医学博士说，他是米兰比可卡大学的助理熏陶，也是意大利蒙扎Fondazione IRCCS San Gerardo的肾脏病理学家。

　　他填充道：“咱们信赖，数字化WSI的刚果红荧光判辨与盘算病理学东西相连系，能够饱动肾淀粉样变性的探索和诊断。”

　　肾淀粉样变性是由肾脏中毛病折叠的卵白质（也称为淀粉样卵白）的堆集和积累惹起的。若是不拔除，肾淀粉样卵白会反对肾脏机闭和功用，并导致举办性肾毁伤，最终导致肾衰竭。

　　正在肾脏病理学中，淀粉样卵白的检测是占定具有肾脏旨趣的单克隆免疫球卵白病的第一步，这恐怕促使正在缺乏可检测的肿瘤克隆的情景下下手淋巴瘤或骨髓瘤的化疗。

　　尽量肾淀粉样变性的火速诊断至闭紧要，但目前运用刚果红染料和偏振光显微镜的金轨范测试存正在限度性，这给数字化和探索带来了瓶颈。

　　L’Imperio博士说明说：“刚果红染色仍旧是检测淀粉样卵白重积的金轨范，其评估仍旧必要正在偏振光下运用光学显微镜举办结构搜检。若是由经历富厚的病理医师举办充沛的搜检和评估，这种染色举措能够识别出少量的重积物，但相邻机闭（如胶原卵白）的双折射同时存正在，或者非轨范化的染色计划，恐怕会导致假阴性或假阳性结果。”

　　肾淀粉样变性的诊断仍旧具有挑拨性，反对了正在终末期肾病之行进行过问的致力。当病理学家猜疑肾淀粉样变性时，他们用与淀粉样卵白连系的刚果红染料染色后，正在偏振光下搜检肾活检样本。这发作了一种苹果绿的双折射图案，证据了淀粉样卵白的堆集。

　　L’Imperio博士说：“咱们中央正在寰宇周围内采集分别类型的肾脏活检，云云一个汇集的修树鼓励了向肾脏数字病理方法的周密转换，将光学显微镜和免疫荧光转换为WSI款式。”

　　然而米乐M6网站，偏振光显微镜无法容易数字化，这反对了运用盘算东西完毕判辨主动化的致力。他说：“咱们生气找到治理这个题目的另一种举措。”

　　其它，偏振光显微镜下的刚果红染色无法分别淀粉样卵白和犹如的双折射胶原重积物，后者多量存正在于肾包膜和疤痕结构中。是以，病理医师很难正确地评估淀粉样卵白的紧要水平，更加是正在肾间质中。是以，恐怕会展示误诊，导致这种举办性疾病的疗养延迟。

　　为了降服偏振光显微镜正在检测肾淀粉样卵白方面的限度性，探索职员转向了另一种技艺：正在数字化活检图像平分析德克萨斯红滤光下刚果红的特别血色荧光。他们将这种举措称为“虚拟切片上的刚果红荧光”或简称为“CRFvs”。 为了测试他们提出的举措的功能，他们从他们的积聚库中回想性地检索了154张刚果红染色的肾活检切片，并运用本身荧光和德克萨斯红/TRITC滤光器正在暗场中对其举办数字化，以取得刚果红荧光WSI。由两名独立的病理医师对WSI的阳性率和最终重积物的漫衍举办评分和评估。

　　L’Imperio博士指出：“咱们探索了得克萨斯红/TRITC滤光片下的刚果红荧光正在数字化后是否与‘古代’刚果红双折射和偏振光显微镜具有相仿的功能。”

　　CRFvs与轨范刚果红双折射正在检测淀粉样变性方面显示出近乎完整的查察者间相仿性（k=0.90[95%CI=0.81–0.98]）。当研商基于共鸣的CRFvs评估时，相仿性以至更高（k=0.98，95%CI=0.93–1）。

　　与偏振光显微镜比拟，CRFvs能够很容易地分别肾淀粉样卵白与胶原纤维，从而变动确地对淀粉样卵白的紧要水平举办评分，并对间质病变举办更智慧的量化。两名独立判辨虚拟切片的病理医师相仿地用CRFvs取得比古代举措更高的淀粉样卵白评分。

　　该探索的资深作家之一Fabio Pagni熏陶说：“咱们证据，正在偏光下，刚果红荧光具有与‘古代’双折射相当的功能，声明了淀粉样卵白检测的非劣效性，并开启了将肾脏病理学这一难治性范畴数字化的恐怕性。”

　　对待运用有用的淀粉样卵白评分来评估淀粉样卵白的累及和延长的分别，他说：“这两种技艺的分别本质——光场和暗场——往往高估或低估了特定的区室，如间质，这恐怕导致了数字荧光和双折射之间的分别。”

　　尽量CRFvs能够牢靠地检测到WSI中的肾淀粉样卵白，但靠山荧光有时会遮挡较小的重积物。为理会决这一局限，该团队拓荒了一种主动图像判辨管道，称为“通过刚果红荧光数字判辨检测淀粉样卵白的流线型管道”或“SPADA”，以减去靠山本身荧光并分辨荧光淀粉样卵白信号。

　　SPADA处置每张切片的时辰只需一分众钟，为火速正确的诊断供应加强的图像。当病理医师用SPADA从头评估活检时，他们的淀粉样卵白评分与运用偏振光取得的评分完整相当。

　　“通过从本身荧光靠山中减去实正在的淀粉样卵白信号，SPADA可以火速正确地外征哪怕是微量的淀粉样卵白。”该探索的另一位资深作家Federico Alberici熏陶指出。

　　运用SPADA管道主动检测淀粉样卵白重积是肾脏病理数字化转型的一个枢纽里程碑。必要进一步的劳动来普及对更少量淀粉样卵白的检测，这将有助于病理医师正在没有肾脏专业学问的情景下对具有挑拨性的病例举办外征。

　　与偏振光成像分别，CRFvs天生高质地的数字图像，能够举办盘算判辨。作家以为这是一个令人兴奋的机缘，能够使用人工智能举办淀粉样卵白的主动检测和分型。然而，改日的探索还必要将SPADA管道扩展到其他淀粉样卵白疾病。

　　该探索的另一位资深作家Giovanni Gambaro熏陶暗示：“SPADA检测能够直接转化为区域的激光捕捉显微切割的感兴致区域，将其提交给质谱东西，并连系立异的原位卵白质组学技艺，如基质辅助激光解吸电离质谱成像，这些技艺仍旧正在淀粉样卵白诊断的第二步——重积物分型中浮现了革命性的功用。”

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